二氧化碳培養(yǎng)箱中的微生物往往會(huì)對(duì)培養(yǎng)的結(jié)果產(chǎn)生一定的影響,常見的微生物處理方式包括物理過濾和滅菌,今天給大家說說滅菌處理。
滅菌就是 殺滅或清除傳播媒介上的所有微生物(包括芽胞),使之達(dá)到無菌程度。經(jīng)過滅菌的物品稱“無菌物品”,培養(yǎng)箱內(nèi)的無菌處理是指殺滅所謂微生物、病毒等,徹底避免環(huán)境對(duì)樣本的影響,以及消除不同樣本之間的交叉污染。根據(jù)不同的去除對(duì)象以及應(yīng)用環(huán)境需求,采用有效的方法。
根據(jù)微生物的抵抗能力不同,可將微生物分為如下幾類:
細(xì)菌繁殖體:易被一般的消毒劑殺滅,一般革蘭氏陽(yáng)性細(xì)菌對(duì)消毒劑較敏感,采用化學(xué)消毒效果較為明顯;革藍(lán)氏陰性桿菌則常有較強(qiáng)的抵抗力,一般的化學(xué)消毒效果不明顯,但對(duì)熱敏感,采用熱力學(xué)方法效果明顯。
細(xì)菌芽孢和真菌芽孢:有厚厚的孢子壁,對(duì)化學(xué)消毒劑有較強(qiáng)的抵抗力,一般的化學(xué)消毒對(duì)芽孢效力有限;消毒能力強(qiáng)的化學(xué)試劑對(duì)芽孢有一定的殺滅作用,但對(duì)濃度、處理方法等要求嚴(yán)格;常見的方法是采用熱力學(xué)方法。
病毒:種類較多,不同病毒種類對(duì)外界的抵抗能力不同,化學(xué)試劑消毒的效果也不相同,RNA活性受溫度影響明顯,一般采用熱力學(xué)方法去除。
真菌:普遍對(duì)環(huán)境抵抗能力強(qiáng),一般的紫外消毒方式和化學(xué)試劑消毒達(dá)不到預(yù)期的效果,通常采用熱力學(xué)方法處理,煮沸或使用高壓滅菌燈。
培養(yǎng)箱內(nèi)常見的熱力學(xué)滅菌方法包括干熱滅菌和濕熱滅菌。
①干熱滅菌:將箱體內(nèi)加熱到120℃以上,濕度為20% 以內(nèi),持續(xù)一定的時(shí)間,通過高溫使蛋白質(zhì)及核酸變性失活,達(dá)到殺滅的目的。干熱140℃,2-4小時(shí),是較為理想的滅菌方式,可以起到徹底滅菌的作用。。
②濕熱滅菌:濕熱滅菌指溫度超過100 ℃后水轉(zhuǎn)變?yōu)樗羝a(chǎn)生高壓強(qiáng)對(duì)微生物進(jìn)行高壓及穿透性導(dǎo)熱滅菌,通常使用120 ℃通過高壓滅菌器進(jìn)行滅菌才能達(dá)到效果。而培養(yǎng)箱無法承受高壓,所以使用90℃濕熱滅菌因溫度低于100 ℃而無法達(dá)到理想的濕熱滅菌效果。
由此可見,培養(yǎng)箱采用干熱高溫滅菌是目前一種可行且效果極佳的滅菌方法,能徹底消滅細(xì)菌、真菌、孢子、病毒等微生物且沒有二次污染。最好一個(gè)季度采用一次高溫滅菌,消除潛在的污染風(fēng)險(xiǎn)。
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