首先,先讓我們一起來了解一下什么是搖床的振幅以及氧氣傳遞效率,所謂的搖床振幅指的是托盤在做圓周運(yùn)動(dòng)時(shí)候的直徑,也被叫做振蕩直徑。而氧氣傳遞效率指的是氧氣從大氣中傳入到液體中的效率,一般用OTR表示,OTR越高,氧傳遞效率越高。
振幅和轉(zhuǎn)速的影響:
以上兩個(gè)因素都影響培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)基的混合,混合效果越好,氧傳遞速率就越好,遵循這些指導(dǎo)原則,可以選擇適合的振幅和轉(zhuǎn)速。一般來說,選擇25mm振幅可以作為萬能振幅應(yīng)用于所有培養(yǎng),正因?yàn)槿绱耍蠖鄵u床的振幅都是25毫米。在一些應(yīng)用中,如果對(duì)氧傳遞/細(xì)胞生長(zhǎng)有特殊的限制,可能會(huì)選擇一些特殊的振幅。
在許多情況下即使選擇了合理的振幅,也未必能增加生物培養(yǎng)量,因?yàn)榕囵B(yǎng)量的增加會(huì)受到多個(gè)因素影響。舉例:如果十個(gè)因素中有一兩個(gè)不理想,那么無論其他因素有多好,培養(yǎng)量的增長(zhǎng)都是有限的,或者可以這樣說,如果培養(yǎng)量的受限因素只有氧傳遞時(shí),振幅的正確選擇會(huì)得到明顯的培養(yǎng)箱增加。比如,碳源若是受限因素,無論氧傳遞效果多好,也不會(huì)達(dá)到理想的培養(yǎng)量。
振幅和轉(zhuǎn)速都會(huì)對(duì)氧傳遞造成影響,如果在轉(zhuǎn)速很低(比如100rpm)的細(xì)胞培養(yǎng)中,振幅的不同對(duì)氧傳遞幾乎沒有明顯影響。要達(dá)到較高的氧傳遞效果,首先是盡可能的提高轉(zhuǎn)速,托盤會(huì)適當(dāng)?shù)钠胶廪D(zhuǎn)速。并不是所有的培養(yǎng)物都能夠在高速震蕩下良好生長(zhǎng),一些對(duì)剪切力敏感的培養(yǎng)物,高轉(zhuǎn)速會(huì)導(dǎo)致培養(yǎng)物死亡。
其他影響因素:
1、裝液量:錐形燒瓶的裝液量為不超過總體積的三分之一。如果要達(dá)到最大氧傳遞,裝液量不能超過10%。永遠(yuǎn)不要將裝液量達(dá)到50%。
2、擾流板:在所有類型的培養(yǎng)中,擾流板都有效提高氧傳遞。有些廠家推薦使用“chao高產(chǎn)量”培養(yǎng)瓶。這種瓶的擾流板會(huì)增大液體摩擦力,搖床可能會(huì)達(dá)不到最zui大設(shè)定轉(zhuǎn)速。
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